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Luminex公司每群圈出的微球區(qū)域熒光分布較窄,即使在兩個(gè)熒光通道的批間熒光CV高于5%都會(huì)出現(xiàn)較嚴(yán)重的偏離,在當(dāng)前Luminex如此苛刻的設(shè)置下,其它廠家制備能在Luminex儀器上使用的磁性熒光編碼微球的難度甚至比Luminex公司自身生產(chǎn)微球還高。
基于我們?cè)跓晒饩幋a中積累的成熟技術(shù),我們可以隨意調(diào)控微球在“Classification1"和“Classification2"熒光通道內(nèi)的熒光強(qiáng)度,因此具備了研發(fā)能在L家儀器上直接使用的微球的能力。如圖1所示,我們制備的24群微球能很好的落在L家的“圈圈"內(nèi)。到目前為止,我們已經(jīng)制備出40種能在Luminex200上使用的微球,后續(xù)我們將持續(xù)開發(fā)更多的能在L家儀器上使用的磁性熒光編碼微球。
圖1 可在Luminex200上的清晰區(qū)分的磁性熒光編碼微球
此外,我們也在分群差錯(cuò)率方面,評(píng)估了這些微球是否能真正清晰區(qū)分,我們隨機(jī)選擇了12種微球,對(duì)應(yīng)Luminex200的編碼為:12,18,25,26,35,51,54,61,66,67,72,78。并對(duì)單群微球逐一上機(jī)(Luminex200),統(tǒng)計(jì)各個(gè)編碼微球數(shù)量,得到如下報(bào)告:
圖2 12群微球上機(jī)得到的報(bào)告圖
從結(jié)果中可以看出,多個(gè)編碼的微球分群差錯(cuò)率為0,整體微球分群差錯(cuò)率不高于2%,這里面還包括了批量進(jìn)樣時(shí)清洗不干凈導(dǎo)致的錯(cuò)判,因此實(shí)際的分群差錯(cuò)率更低。此外,由于報(bào)告熒光值一般采用中位數(shù)熒光值,這么低的錯(cuò)判率不會(huì)影響最終結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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